產(chǎn)品名稱:：胰蛋白酶活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Trypsase Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC2310            產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣         產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：620
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: 胰蛋白酶檢測試劑盒|胰蛋白酶檢測|胰蛋白酶|試劑盒

簡要介紹：
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈，是一種重要的消化酶。此外，胰蛋白酶還廣泛應(yīng)用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。 
    胰蛋白酶催化水解BAEE的酯鍵，生成BA，BA在253nm處有吸收峰，通過測定253nm 吸光度增加速率，即可計算出胰蛋白酶的活性。 

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1支，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水充分溶解。
試劑二：液體50mL×1瓶，4℃保存。

產(chǎn)品說明：
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈，是一種重要的消化酶。此外，胰蛋白酶還廣泛應(yīng)用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
胰蛋白酶催化水解BAEE的酯鍵，生成BA，BA在253nm處有吸收峰，通過測定253nm 吸光度增加速率，即可計算出胰蛋白酶的活性。
試驗所需自備儀器和樣品：
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提取：
稱約0.1g組織，加入1mL提取液，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清，即粗酶液，置冰上待測。或直接稱取0.1g酶制品，加入1mL提取液，置冰上待測。
二、測定：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到253 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 工作液的配制：將試劑一與試劑二按 2:97配置工作液，按需配制，并置于37℃水浴預(yù)熱30min以上。
3. 空白管：取1mL石英比色皿，加入990µL工作液，再加入10μL蒸餾水，混勻，迅速于253nm測定0s和60s的吸光度，記為△A空白。
4. 測定管：取1mL石英比色皿，加入990µL工作液，再加入10μL粗酶液，混勻，迅速于253nm測定0s和60s的吸光度，記為△A測定。
三、胰蛋白酶活性計算：
1.按蛋白濃度計算：
活性單位（U）定義：在1mL體系下，37℃每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化253nm處吸光值增加0.001為一個單位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A測定-△A空白) ÷0.001÷（Cpr×V1）÷T
=100000×(△A測定-△A空白) ÷Cpr
2.按樣本鮮重計算：
活性單位（U）定義：在1mL體系下，37℃每克組織每分鐘催化253nm處吸光值增加0.001為一個單位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A測定-△A空白) ÷0.001÷（W×V1÷V2）÷T
=100000×(△A測定-△A空白) ÷W
Cpr：粗酶液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測定；W：組織質(zhì)量（g）；V1：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積（mL），10μL=0.01 mL；V2：粗酶液總體積（mL），1 mL；T：反應(yīng)時間（min），1min。
注意事項：
實驗前用1～2個樣做預(yù)實驗，保證吸光值變化在0.01～0. 15之間。


相關(guān)文獻：
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang，Ruo‐Lun Wei，Wei Du，Li‐Wei Zhang，Tao Du，Ya‐Dong Geng，Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影響因子:4.458 PMID:30924320




 

胰蛋白酶活性檢測試劑盒