A． 本分離液是敏光型的，在運輸和貯藏過程中應(yīng)在 18℃-25℃避光保存，啟封后置 4

℃保存避免微生物污染。另外，本品為真空包裝，未啟封前置于 10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶，

影響分離效果。

B． 待分離的血液、組織及細胞要求新鮮，避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一

定在20℃水浴箱中復(fù)溫20分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時分離效果，

且所有操作過程一定要在無菌條件下進行。

C． 由于各品牌離心機的性能不同，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異，可能影響

分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)，調(diào)節(jié)離心的時間，摸索佳的分離條件（具體分離條件

各實驗室自定）。

D． 使用無靜電反應(yīng)的離心管，推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。

E． 優(yōu)抗凝劑選擇：EDTA、枸櫞酸、肝素。應(yīng)注意在血液稀釋過程中應(yīng)去除抗凝劑

體積。

F． 分離過程中所用其他試劑如：羥乙已基淀粉 550、全血及組織稀釋液、細胞洗滌液及紅細

胞裂解液等以我公司產(chǎn)品為優(yōu)選擇，本公司相關(guān)系列產(chǎn)品無菌、無病毒、無支原體、低內(nèi)

毒素水平且無細胞毒性，所獲得的細胞可保持完好的生物活性和完整的細胞形態(tài)。

4. 應(yīng). 用

適用于從動物血液或臟器組織中分離單核細胞。

5.. . . 產(chǎn)品性能指標(biāo)

pH 7.0-7.5

滲透壓 280-340mOsmol/kg

內(nèi)毒素 ≤0.5...EU/ml

無菌 直接接種培養(yǎng) 14 天后培養(yǎng)基澄清

澄明度及不溶性顆粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下，，，

含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下

6.

7. 實驗前準(zhǔn)備 7. 實驗前準(zhǔn)備

A． 試劑

單核細胞分離液試劑盒所含試劑、組織勻漿液、羥乙已基淀粉 550、胎牛血清

B． 器材

玻璃離心管、玻璃滴管

水平轉(zhuǎn)子離心機、無菌工作臺

8. 各種動物 8. 各種動物單核細胞分離液試劑盒使用方法說明及圖例

A. 在 10ml 或 15ml 玻璃離心管中依次小心加入 A、D 兩種液體各 2ml,制成梯度界面（各液面分層一定要清晰）；

B． 取 1ml新鮮抗凝血按1：1比例與全血及組織稀釋液混勻并小心疊加于D液之液面上；或?qū)⒔M織單細胞懸液（細胞濃度為2×108

-1×109個/ml，制備方法詳見“10.組織單細胞懸液的制備方法”）疊加于D液之液面上；

C. 以400g（約1500轉(zhuǎn)/分）離心15分鐘(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子)；

此時離心管中由上下細胞分為六層。*層；為血漿（稀釋液）層。第二層；；；為；單核

細胞層。。。第三層；為透明 D 液層。第四層；為淋巴細胞層。第五層；為透明 A 液層。第六層；

為極少量紅細胞層。收集第二層單核細胞放入含 4-5ml 細胞洗滌液的試管中，充分混勻后，

以 500g（約 1800 轉(zhuǎn)/分）離心 20 分鐘，棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復(fù)洗滌 2 次即得所需單核細胞。

注：：A. 提取率約為 80%。