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氨基酸(AA)含量檢測試劑盒

動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官，故尿中氨基酸的變化能反應(yīng)肝、腎的生理狀態(tài)。另外，氨基酸還能反應(yīng)灼傷、傷寒等方面情況。植物體內(nèi)氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。氨基酸的 α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng)，產(chǎn)生藍紫色化合物，在 570 nm 有特征吸收峰；通過測定 570 nm 吸光度，來計算氨基酸含量。

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一、樣品中氨基酸提?。悍Q取約 0.1g 組織，加試劑一 1mL，室溫下充分研磨，轉(zhuǎn)移到 1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取 15 min；自來水冷卻后，10000rpm，4℃離心 10min，取上清液，待測。

二、測定： 1. 分光光度計預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長到 570 nm，蒸餾水調(diào)零。 2. 在 EP 管中加入下列試劑試劑名稱（μL）測定管 標準管 空白管樣本 10 — — 標準品 — 10 — 蒸餾水 — — 10 試劑二 100 100 100 試劑三 100 100 100 試劑四 10 10 10 混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫 15 min，冷卻后反復(fù)顛倒 EP 管數(shù)次，將 測定管 8000rpm 離心 5min 后取上清，于 570nm 測定吸光值。顯色后務(wù)必在 30min 內(nèi)測完。

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計算（1）按蛋白濃度計算氨基酸含量（μmol /mg 蛋白）=[C 標準品×V 標準品×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)] ÷（Cpr×V 樣）=10×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白) ÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算氨基酸含量（μmol /g 鮮重）=[C 標準品×V 標準品×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)]×（V 樣總 ÷V 樣）÷W=10×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白) ÷W C 標準品：標準品濃度，10 μmol/mL；V 標準品：反應(yīng)體系中加入標準品體積，0.01 mL；W：樣品質(zhì)量，g；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣品提取液體積，0.01 mL；V 樣總：樣品提取液總體積，1mL； Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL。