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Elisa試劑盒的OD值不正常是什么原因?

更新時(shí)間:2022-05-18點(diǎn)擊次數(shù):732
  OD是optical density(光密度)的縮寫(xiě),表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度,是檢測(cè)方法里的專(zhuān)有名詞,檢測(cè)單位用OD值表示,OD=lg(1/trans),其中trans為檢測(cè)物的透光值。因此又叫通光率,也稱(chēng)吸光度。
 
  光通過(guò)被檢測(cè)物,前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,特定波長(zhǎng)下,同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
 
  《科技編輯大辭典》對(duì)光密度的定義是:入射光強(qiáng)度與透射光強(qiáng)度之比值的常用對(duì)數(shù)值。專(zhuān)業(yè)書(shū)籍則這樣解釋“吸光度":入射光和透射光的透過(guò)率之比值的常用對(duì)數(shù)值,也稱(chēng)光密度。分析可見(jiàn),兩個(gè)概念其實(shí)是一致的,“光密度"就是“吸光度",且用“光密度"符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),更規(guī)范。
 
  檢測(cè)單位用OD值表示, OD=lg(1/trans),其中trans為檢測(cè)物的透光值。
 
  由于Elisa試劑盒的操作步驟復(fù)雜,影響反應(yīng)因素較多,在實(shí)驗(yàn)問(wèn)題中出現(xiàn)了一些大大小小的問(wèn)題。然而這些問(wèn)題也都是可以避免的,熟練掌握之后就會(huì)簡(jiǎn)單的多。近日,有位客戶(hù)對(duì)Elisa試劑盒提出問(wèn)題:OD值不正常是什么情況?是什么原因?
 
  1.試劑盒未回溫(對(duì)應(yīng)解決方法:試劑盒回溫到25℃);
 
  2.溫度控制不好(對(duì)應(yīng)解決方法:控制正確溫度);
 
  3.孵育時(shí)間不準(zhǔn)確(對(duì)應(yīng)解決方法:控制孵育時(shí)間);
 
  4.洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加(對(duì)應(yīng)解決方法:洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干);
 
  5.陽(yáng)光直射,對(duì)著風(fēng)直接吹(對(duì)應(yīng)解決方法:避風(fēng)避陽(yáng));
 
  6.酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)錯(cuò)誤(對(duì)應(yīng)解決方法:酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)450nm);
 
  7.抗體的稀釋錯(cuò)誤(對(duì)應(yīng)解決方法:正確的稀釋抗體);
 
  8.水質(zhì)問(wèn)題(對(duì)應(yīng)解決方法:用礦泉水代替)。

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