如何校正ELISA試劑盒實驗中的錯誤?

更新時間：2021-04-27

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　　ELISA試劑盒有許多實驗操作步驟，新手操作難免出錯。其中許多錯誤是由不充分的細(xì)節(jié)造成的。有很多方法可以減少這種錯誤，比如在做實驗時少說話，以防止唾液掉進(jìn)酶的標(biāo)簽中。當(dāng)然，我們也要學(xué)會探索自己的問題，找出原因。那么，我們?nèi)绾胃倪M(jìn)ELISA試劑盒實驗中的錯誤呢?

　　1、評價試劑的實用性：試劑的穩(wěn)定性對準(zhǔn)確度非常重要。在啟用試劑盒之前，應(yīng)重復(fù)檢測陰性和陽性對照品和樣品，試劑僅在試劑符合要求后才能使用。

　　2、操作前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書：嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作。不同批號的試劑不混合。值得改進(jìn)的是，只有經(jīng)過反復(fù)的試驗，如洗盤的數(shù)量，才能加以改進(jìn)。

　　3、加樣要準(zhǔn)確、快速：樣品添加的不準(zhǔn)確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果。此外，顯色深度和A值的確定與顯色劑和最終液體的加入量有關(guān)，因此樣品的裝載應(yīng)謹(jǐn)慎。需要在一定時間內(nèi)完成采樣的實驗，如果采樣速度慢，會出現(xiàn)誤差，試劑會暴露很長時間，特別是當(dāng)室溫過高時，保質(zhì)期會縮短甚至失效。

　　4、檢驗技術(shù)人員應(yīng)具備實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗：檢測技術(shù)人員能夠熟練操作實驗儀器儀表，具有一定的總結(jié)和分析問題的能力，能及時、妥善地解決試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外情況。

　　5、洗滌要*：洗版不*，酶偶聯(lián)物的背景顏色為假陽性。此外，清潔劑應(yīng)該是新鮮的，可以隨時使用。舊的洗滌劑會增加背景，也可能出現(xiàn)假陽性。

　　6、嚴(yán)控ELISA試劑盒實驗反應(yīng)時間：試劑盒反應(yīng)時間過長，酶被滅活，反應(yīng)時間過短，酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結(jié)合，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定，易清洗，易產(chǎn)生假陰性。

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