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ELISA試劑盒的基本原理有這三條,你知道嗎?
2020-10-26
ELISA試劑盒因此含雜質(zhì)較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯(lián)絡(luò)的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的效果于??蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時(shí)),以增加其吸附功能。例如,在檢查抗DNA抗體時(shí),需用DNA作為包被抗原,ELISA試劑盒而廣泛的固相載體一般不能直接與核酸聯(lián)絡(luò)。換言之,包被就是抗原或抗體聯(lián)絡(luò)到固相載體表面的進(jìn)程。當(dāng)抗原決定簇...
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ELISA試劑盒洗滌的兩大方法
2020-10-14
洗滌雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟,但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。重點(diǎn)分析:ELISA試劑盒洗滌的兩大方法一、浸泡式1.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);3.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動(dòng),浸泡時(shí)間不可隨意縮短;4.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液...
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ELISA試劑盒在試驗(yàn)過程中需要注意什么
2020-10-12
ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的試驗(yàn)確診方法。盡管ELISA試劑盒的操作過程看似簡(jiǎn)單,但沒做到位的話就會(huì)影響試驗(yàn)的作用。所以在試驗(yàn)過程中這幾點(diǎn)非常重要:1、重要的洗刷:不充分的洗刷會(huì)導(dǎo)致差異和高布景,從而帶來不抱負(fù)的試驗(yàn)結(jié)果。假如未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會(huì)添加布景噪音。有必要的話,可添加洗刷液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特異結(jié)合反響。假如布景過高,置疑洗刷不行時(shí),能夠測(cè)驗(yàn)添加洗刷次數(shù)。2、關(guān)鍵的關(guān)閉:關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位...
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ELISA試劑盒的選購指南
2020-09-27
目前市場(chǎng)上的ELISA試劑盒質(zhì)量參差不齊,如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要,具體有以下幾點(diǎn)可供參考:一、特異性:ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分,抗體對(duì)有關(guān),若抗體對(duì)中之一為多抗,另一個(gè)必須為單抗,建議使用雙單抗。二、靈敏度:靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標(biāo)量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的ELISA試劑盒。三、重復(fù)性:科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性,一般ELISA試劑盒,其板內(nèi)和板間...
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你知道緩沖液的原理嗎?
2020-09-25
當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí),有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HOAc與NaOAc),弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對(duì)酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時(shí),H+離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時(shí),溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液...
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胰蛋白酶消化液對(duì)細(xì)胞的分離效果與哪些因素有關(guān)
2020-09-23
在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散(將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液)和傳代細(xì)胞培養(yǎng)中,貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液.胰蛋白酶消化液一共有三種,分為胰蛋白酶-EDTA消化液(不含酚紅);胰蛋白酶-EDTA消化液(含酚紅);胰蛋白酶消化液(不含酚紅),可根據(jù)客戶的需要來選擇.其中,胰蛋白酶含量為0.25%(2.5g/L),EDTA含量為0.02%(0.2g/L).PBS為常用的不含鈣鎂的細(xì)胞培養(yǎng)用PBS.經(jīng)無菌過濾,可直接使用.胰蛋白酶消化液對(duì)細(xì)胞的分...
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衣霉素的用途及作用機(jī)理講解
2020-09-23
衣霉素為放線菌產(chǎn)生的核苷酸抗生素(antibiotic)??梢种凭哂斜荒?envelope,含糖蛋白)的病毒的繁殖。作用機(jī)理是抑制合成糖蛋白糖鏈必需的擬脂(多萜醇,dolichol)中間產(chǎn)物的生成。又因?yàn)樗梢种圃诤铣杉?xì)菌細(xì)胞壁(cellwall)的肽聚糖或胞壁酸中必需的擬脂(細(xì)菌萜醇,多聚萜醇)中間產(chǎn)物的形成,所以顯示對(duì)革蘭氏陽性菌的抗菌性。z近,利用這種抑制擬脂中間產(chǎn)物形成的作用,來探索糖類復(fù)合物的活體合成及其功能。衣霉素用途:生化試劑。衣霉素為鏈霉菌屬Streptomy...
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干貨分享!移液器的使用方法和其使用注意事項(xiàng)
2020-04-23
移液器也叫移液槍,是在一定量程范圍內(nèi),將液體從原容器內(nèi)移取到另一容器內(nèi)的一種計(jì)量工具。被廣泛用于生物、化學(xué)等領(lǐng)域。移液器在臨床實(shí)驗(yàn)室中因?yàn)榛窘Y(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,使用方便等原因而得到廣泛應(yīng)用。其基本結(jié)構(gòu)主要有顯示窗、容量調(diào)節(jié)部件、活塞、0-形環(huán)、吸引管和吸頭(吸液嘴)等幾個(gè)部分。下面我來給大家講講移液器的使用方法和其使用注意事項(xiàng):使用方法:1.選擇合適的移液器移取標(biāo)準(zhǔn)溶液(如水、緩沖液、稀釋的鹽溶液和酸堿溶液)時(shí)多使用空氣置換移液器,移取具有高揮發(fā)性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm...