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教你成為平淡無奇的WB小能手—凝膠制備
2021-02-26 WB實(shí)驗(yàn)流程●樣本采集保存，蛋白提取相關(guān)知識，請●蛋白定量和蛋白變性相關(guān)知識，請現(xiàn)在正式進(jìn)入跑膠環(huán)節(jié)，這一次，讓小編帶您總結(jié)一下制膠相關(guān)的知識點(diǎn)：SDS-凝膠電泳系統(tǒng)采用的是不連續(xù)性系統(tǒng)，上層為濃縮膠（或積層膠），下層為分離膠，先配制分離膠，濃縮膠pH6.8，可以通過甘氨酸和和氯離子之間形成的電壓對蛋白樣品產(chǎn)生壓縮，從而使蛋白樣品壓成一條狹窄的條帶，處于同一條線上；分離膠pH8.8，與甘氨酸的pka接近，從而使不同分子量的蛋白產(chǎn)生不同的泳動速度，從而使不同分子量的蛋白分開。分...
乙酰膽堿酯酶測定試劑盒的測定原理是什么？
2021-02-04 乙酰膽堿酯酶(AChE)是可將神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿(ACh)水解為乙酸和膽堿的一類酶。AChE位于突觸間隙中，通過降解ACh來終止突觸傳遞，從而使得膽堿神經(jīng)元在激活后回復(fù)到靜息狀態(tài)。AchE活性的改變可能是由于在某些種類的殺蟲劑條件下暴露所造成的，在這時候這些殺蟲劑起到了膽堿酯酶抑制劑的作用。AChE的抑制劑也可用于治療如癡呆在內(nèi)的某些疾病。乙酰膽堿酯酶測定試劑盒具有測量敏感、準(zhǔn)確、操作簡便等特點(diǎn)，只需加入單一反應(yīng)試劑，然后室溫下分別在反應(yīng)后的2分鐘和10分鐘讀取儀器數(shù)據(jù)即可?？?..
教你成為平淡無奇的WB實(shí)驗(yàn)小能手—樣本制備篇（續(xù)）
2021-01-29 WB實(shí)驗(yàn)流程樣本制備的步驟關(guān)于樣本采集和保存，蛋白提取的相關(guān)知識和技巧請查看：接下來，讓小編帶您總結(jié)關(guān)于蛋白定量和蛋白變性相關(guān)的知識點(diǎn)：一蛋白定量測定蛋白常用的方法有Bicinchoninicacid(BCA)法、Lowry法和Bradford法（考染法）1.BCA法的測定原理是蛋白質(zhì)將銅離子還原成亞銅離子，后者在堿性溶液中與BCA結(jié)合生成紫紅色結(jié)合物，該復(fù)合物在562nm處有吸光值且與蛋白質(zhì)濃度成正相關(guān)性，據(jù)此可測定蛋白質(zhì)濃度。考馬斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色，大光吸收在488...
定位重塑型納米凝膠介導(dǎo)共遞送抗血管藥物自噬抑制劑，實(shí)現(xiàn)腫瘤的協(xié)同治療
2021-01-29 腫瘤是一種復(fù)雜難治的疾病，對人類健康存在重大威脅。當(dāng)腫瘤體積超過2-3mm3時，腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移與擴(kuò)散主要依靠自身的血管系統(tǒng)來提供必要的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)。而在缺乏血管的情況下，腫瘤具有自限性生長的特點(diǎn)。因此，將腫瘤血管作為靶點(diǎn)，抑制它的形成或破壞其存在，直接切斷腫瘤增殖與轉(zhuǎn)移的營養(yǎng)通道，是一個有吸引力的治療策略。目前，根據(jù)作用機(jī)制的不同，血管靶向藥物（VTAs）主要包括兩大類：血管生成抑制劑（AIs）和血管阻斷劑（VDAs）。在VDAs中，康普瑞汀（CA4）作為常用的小分子血管...
在使用維生素B6測定試劑盒時，要注意的細(xì)節(jié)有哪些？
2021-01-27 維生素B6（VitaminB6）又稱吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在體內(nèi)以磷酸酯的形式存在，是一種水溶性維生素，在細(xì)胞中參與多種蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝，對生物體具有極其重要的作用。測定的原理是：維生素B6與4-氨基安替比林在強(qiáng)氧化劑作用下生成穩(wěn)定的黃色化合物，在390nm有特征吸收峰?？捎糜谟糜跍y定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。維生素B6測定試劑盒在使用時，要注意以下幾點(diǎn)：1、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。2、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，...
什么是重組人胰島素？
2021-01-25 胰島素是由朗格漢斯胰島β細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸等的刺激而分泌的一種多肽激素。重組人胰島素是將人的胰島素DNA的片段裁剪到大腸桿菌身上，讓大腸桿菌分泌出與人所分泌的一模一樣的胰島素。因?yàn)槭褂昧嘶蛑亟M技術(shù)，所以也叫重組胰島素。重組人胰島素為白色或類白色的結(jié)晶性粉，在水、乙醇中幾乎不溶，在稀鹽酸和稀氫氧化鈉溶液中易溶，是一種作用于內(nèi)分泌系統(tǒng)的降糖藥物，屬于胰島素。重組人胰島素與天然胰島素有相同的結(jié)構(gòu)和功能。重組人胰島素的作用是：調(diào)節(jié)糖代謝，同時促進(jìn)肝...
CCK-8試劑做實(shí)驗(yàn)時有哪些需要注意的事項(xiàng)
2021-01-25 今天我給大家說說用CCK-8試劑做實(shí)驗(yàn)時的注意事項(xiàng)：1.第一次做實(shí)驗(yàn)時，建議先做幾個孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。2.接種時注意細(xì)胞懸液一定要混勻，以避免細(xì)胞沉淀下來，導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不一致。3.培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)液容易揮發(fā)，為減少誤差，建議培養(yǎng)板周圍的四邊每孔只加培養(yǎng)基。4.建議采用多通道移液器，減少平行孔間的誤差，加CCK-8時，建議斜貼著培養(yǎng)板壁加，不要插到培養(yǎng)基液面下加，容易產(chǎn)生氣泡，干擾OD值。5.若細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，培養(yǎng)基顏色或pH發(fā)...
敲黑板這些免疫組化FAQ助您攻破實(shí)驗(yàn)難點(diǎn)
2021-01-22 免疫組織化學(xué)（簡稱免疫組化）是組織化學(xué)的一種，它是利用已知的特異性抗體與抗原能特異性結(jié)合的特點(diǎn)，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記于結(jié)合后的特異性抗體上的顯示劑，如酶、金屬離子、同位素等，顯示一定的顏色，并借助顯微鏡觀察其顏色的變化，從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的化學(xué)成份或化學(xué)性質(zhì)。實(shí)驗(yàn)過程包括切片制作（固定，脫水，透明，包埋，切片，貼片，烤片），脫蠟，水化，阻斷，抗原修復(fù)，封閉，一抗孵育，二抗孵育，顯色，復(fù)染，封片，分析。IHC是一項(xiàng)具有挑戰(zhàn)性的應(yīng)用技術(shù)，應(yīng)用過程中常出現(xiàn)各種問...

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